在雜交瘤細胞制備的過程中，雖然篩選出來的雜交瘤細胞能夠通過冷凍保存，但是依然存在細胞失活的風險。所以，為了克服雜交瘤細胞保存的問題，我們常常會選擇對雜交瘤細胞進行測序，能夠快速且準確地進行后期的抗體制備。今天，普健生物和大家具體聊聊有關(guān)雜交瘤細胞測序的具體步驟和應(yīng)用。

　　雜交瘤細胞測序的具體步驟：

　　1、雜交瘤細胞培養(yǎng)。先取出雜交瘤細胞進行復蘇，然后在37度的環(huán)境下培養(yǎng)10天，至細胞生長旺盛時再收集細胞;

　　2、mRNA提取。裂解細胞后加入氯仿，離心15分鐘后提取上清液。取上清液并加入異丙醇離心10分鐘，取沉淀洗凈，晾干后加入適量DEPC溶解;

　　3、轉(zhuǎn)率cDNA。選擇合適的反應(yīng)體系進行擴增，合成cDNA第一條鏈，而后根據(jù)已知的cDNA合成第二條鏈;

　　4、獲得可變區(qū)基因。對cDNA進行擴增，獲得輕鏈/重鏈可變區(qū)基因;

　　5、抗體測序。對基因進行陽性克隆并測序;

　　6、分析測序結(jié)果。通過生物信息學分析，得到抗體序列;

　　雜交瘤細胞測序的優(yōu)勢：

　　雜交瘤測序可以更為準確地進行質(zhì)譜分析，能夠提供更加準確且可靠的結(jié)果;

　　雜交瘤細胞測序的應(yīng)用：

　　1、用于進行相關(guān)基因測序的專利性保護;

　　2、用于保存測序信息，防止雜交瘤細胞丟失單抗信息;

　　3、用于表達純度更高的重組單克隆抗體;

　　4、縮短雜交瘤細胞克隆的耗時過程，加速單克隆抗體生產(chǎn);

　　5、提升單抗親和力;

　　6、構(gòu)建嵌合抗體以及抗體人源化;

　　雜交瘤抗體測序能夠帶來的好處是毋庸置疑的，不僅能夠有效降低抗體制備的批次性差異問題，更是能夠在極大程度上提升抗體的親和力。當然了，測序的過程相對來說要復雜一些，需要一定的技術(shù)支持。普健生物專業(yè)為廣大用戶提供雜交瘤抗體測序服務(wù)，如果您有相關(guān)需求，歡迎來電咨詢。