1993年比利時(shí)科學(xué)家Hamers在駱駝體內(nèi)發(fā)現(xiàn)了天然重鏈抗體，其重鏈可變區(qū)VHH(the variable domains of the heavy chain of heavy chain only antibodies)能夠克服傳統(tǒng)全長(zhǎng)抗體組織穿透性差、免疫原性強(qiáng)等缺陷。VHH即納米抗體(Nanobody，Nb)具有高親和力、特異性強(qiáng)、分子量小、低免疫原性和高水溶性等特點(diǎn)。然而靶向單一抗原可能會(huì)由于免疫逃逸等難以滿足療效。
雙特異性納米抗體(bispecific nanobody, BsNb)能夠同時(shí)識(shí)別兩種不同的抗原或者表位,相比于納米抗體具有更強(qiáng)的特異性、靶向性和更低的脫靶毒性,在治療中體現(xiàn)出雙靶點(diǎn)信號(hào)阻斷、降低免疫逃逸與耐藥性的優(yōu)勢(shì)。通過基因工程對(duì)納米抗體進(jìn)行雙特異性抗體設(shè)計(jì),再借助計(jì)算機(jī)模擬進(jìn)行體外親和力成熟從而獲得高親和力抗體序列。雙特異性納米抗體靶標(biāo)結(jié)合力的增強(qiáng)和血清半衰期的延長(zhǎng)可使其效能得到提高,在感染、腫瘤及免疫領(lǐng)域診斷與治療中已成為研究熱點(diǎn)。

納米抗體的CDR3區(qū)增長(zhǎng)并具有“凸形”結(jié)構(gòu)，作為抗原識(shí)別位點(diǎn)可抑制載脂蛋白L-1 酶活性殺滅錐體蟲，治療非洲錐蟲病。根據(jù)其高穩(wěn)定性特點(diǎn)，Ren等制備出識(shí)別特定肽標(biāo)記的納米抗體，用于親和層析技術(shù)而提升蛋白質(zhì)純化效率，為高效純化提出新的策略。納米抗體表面親水不與輕鏈結(jié)合而易聚合，利用基因工程可將兩種針對(duì)腫瘤不同靶標(biāo)的納米單體構(gòu)建出雙特異性抗體用于提升抗腫瘤抗體的特異性。安進(jìn)設(shè)計(jì)出用連接肽將納米抗體與重鏈抗體的N端遺傳融合的雙特異性重鏈抗體BiTE，可同時(shí)與T細(xì)胞和病變細(xì)胞結(jié)合，增強(qiáng)T細(xì)胞殺傷作用特異性。

盡管單價(jià)納米抗體分子量小對(duì)穿透組織有利，但也使其在血清中的半衰期較短導(dǎo)致易被快速清除而難以發(fā)揮療效。納米抗體與白蛋白融合或多聚納米抗體可延長(zhǎng)其血清半衰期以改善其藥代動(dòng)力學(xué)特征，在類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等疾病的治療中有著潛在的應(yīng)用價(jià)值。例如，白蛋白結(jié)合雙特異性納米抗體構(gòu)建的ALX-0061和ATN-103(Ozoralizumab)，可以分別靶向白介素-6(IL-6)和腫瘤壞死因子α(TNF-α)從而達(dá)到療治類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的目的。

參考文獻(xiàn)
YUAN Bo,WANG Jie-wen,KANG Guang-bo,HUANG He. Research Progress and Application of Bispecific Nanobody. China Biotechnology, 2021, 41(2/3): 78-88.

 

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