蛋白表達服務是一種有專業(yè)蛋白表達公司提供的特定蛋白表達服務,通過利用各種技術手段,為客戶提供高特異性、高親和力的蛋白產品。蛋白表達一般需要選擇合適的表達系統(tǒng),配合基因手段,就能夠實現(xiàn)目的蛋白表達。
蛋白表達的常見步驟是怎樣的?
1、基因克隆。根據(jù)設計,將目的基因序列克隆到表達載體中;
2、表達條件優(yōu)化。根據(jù)蛋白的性質,提出相應的表達條件優(yōu)化方法,并根據(jù)宿主細胞的特性,優(yōu)化相關表達環(huán)境;
3、細胞轉染及克隆。將表達載體轉染到宿主細胞中,而后調整相關培養(yǎng)條件,以確保宿主細胞正常表達目的蛋白;
4、蛋白純化。結合蛋白的特性,選擇合適的純化方法(比如親和層析、離子交換層析、凝膠過濾層析等),分離出目的蛋白;
5、蛋白驗證。對所得蛋白進行相關特性驗證(如純度、活性以及結構等);
6、蛋白大規(guī)模生產。蛋白驗證通過后,則開始蛋白的大規(guī)模生產;
但是,在蛋白表達過程中常常會出現(xiàn)各種問題,下面,普健生物和大家具體聊聊會影響到蛋白表達的因素。
1、蛋白特性。蛋白分子大小、蛋白來源、是否毒性、翻譯后修飾程度、結構復雜等特性,都會影響到蛋白的表達量,所以,需要結合實際情況來進行調整;
2、宿主選擇。宿主細胞的本身特性會在極大程度上影響到蛋白的表達;
3、質粒選擇。載體是攜帶外源基因的重要工具,合適的載體能更好的促進蛋白表達,不合適的載體則會影響到蛋白的表達;
4、標簽選擇。標簽的選擇能夠使得蛋白純化變得更加容易,反之則會造成影響到蛋白的表達;
5、系統(tǒng)優(yōu)化。根據(jù)蛋白的特性,選擇合適的蛋白表達系統(tǒng),并根據(jù)蛋白特性來優(yōu)化蛋白表達過程;
在蛋白表達的過程中,常常會遇到這樣或那樣的問題,所以,蛋白表達系統(tǒng)的選擇以及表達過程的優(yōu)化就顯得尤為重要了。在日常蛋白表達過程中,我們需要嚴格按照實驗室標準操作,同時需要注意好各表達細節(jié),這樣才能在更大程度上實現(xiàn)蛋白的表達。武漢普健生物專業(yè)為廣大用戶提供蛋白表達服務,如果您有相關需求,歡迎來電咨詢。