1.載體構(gòu)建
(1)可將cDNA克隆至客戶或者普健生物提供的哺乳細胞的表達載體中
(2)可在表達載體中添加分泌信號肽和純化標簽,促進蛋白分泌表達及滿足一步親和純化的需求
(3)能生產(chǎn)并鑒定高效穩(wěn)定細胞系,適合大規(guī)模發(fā)酵生產(chǎn)
2.穩(wěn)定基因表達符合長期生產(chǎn)需求,整個實驗操作流程提供長期穩(wěn)定及規(guī)??烧{(diào)的蛋白生產(chǎn)
3.瞬時表達(TGE)
(1)與穩(wěn)定基因表達相比,TGE主要適用于短期內(nèi)制備重組蛋白,一般在10天內(nèi)即可快速轉(zhuǎn)染,無需質(zhì)粒DNA的遺傳性選擇
(2)普健生物的瞬時表達使用懸浮細胞,能夠完成毫升到100L的體積的蛋白表達
4.工藝過程開發(fā)及擴大規(guī)模。普健生物能夠優(yōu)化表達過程以及表達產(chǎn)物,預(yù)測細胞表達量,摸索發(fā)酵罐發(fā)酵條件,適合大規(guī)模發(fā)酵生產(chǎn)
5.純化:普健生物擁有完善的蛋白純化系統(tǒng),親和純化,凝膠過濾,離子交換及疏水層析等純化方法,能夠完成各類型蛋白的純化,以及純化工藝的摸索
普健生物提供表達載體構(gòu)建、瞬時轉(zhuǎn)染、表達測試及大規(guī)模動物細胞發(fā)酵和蛋白純化等一站式蛋白技術(shù)服務(wù)。
表達方式 |
細胞 |
瞬時表達 |
HEK293,HEK293細胞來源于293細胞系,采用無血清懸浮培養(yǎng)CHO-S,CHO-S細胞是來自中國倉鼠卵巢細胞的克隆分離株,被馴化為無血清懸浮培養(yǎng) |
穩(wěn)定表達 |
CHO-K1,CHO-K1由CHO衍生而來,該細胞株培養(yǎng)條件簡單、貼壁強度適中,比較容易轉(zhuǎn)染 |
穩(wěn)定細胞株構(gòu)建 |
DG44,DG44 細胞(二氫葉酸還原酶缺陷型 , DHFR-)由中國倉鼠卵巢(CHO)細胞衍生而來,常用于構(gòu)建適合重組蛋白生產(chǎn)的細胞系。DG44細胞篩選和共擴增標記是DHFR基因(dhfr) |
表達載體:pcDNA3.1, pIRES, pTT3, pCEP4,pATX1等