抗體因為隨著使用需求的不同,也發(fā)展出了很多不同的類型,比如內參抗體、標簽抗體。這些抗體針對不同的使用需求,有著不同的特性和使用方法,所以,選擇合適的抗體,也是我們日常工作中非常重要的一環(huán)。那么,什么是內參抗體呢?它的作用又有哪些呢?且看普健生物和您一一講述。
什么是內參抗體?
所謂的內參抗體,我們可以從字面上來解釋,就是內部參照抗體,它和目的抗體沒有直接聯系,而是一種精準制備抗體的輔助抗體。
比如我們需要對不同條件或不同組織細胞中表達的目的蛋白的相對多少進行比較,那么就需要有相同的定量,這樣才會具備比較的基礎。但是在實驗中,可能會因為蛋白濃度不太精準,或者在上樣蛋白的時候,因為操作而產生偏差,這個時候,就需要有一款內部參照抗體來進行校正作用。這類抗體需要在冉細胞或組織間具備恒定的表達特性,而且表達量要高。這類抗體,我們稱之為內參抗體。
如何挑選合適的內參抗體呢?
對于內參抗體的挑選需要注意到很多細節(jié)方面的問題,通常我們可以結合如下四點進行挑選:
1、根據樣本來源挑選。針對哺乳動物的組織細胞樣本,我們可以從GAPDH、COX4等產品中進行挑選,其他來源的樣本,則需要結合相關文獻挑選;
2、根據分子大小挑選。針對分子量的不同,我們需要結合分子大小來挑選合適的內參抗體。在WB實驗中,我們一般選擇大小差異5kDa以上,也就是說不要選擇分子量太過接近的,否則不利于后期的條帶分析;
3、結合表達位置挑選。一般的蛋白檢測可以考慮選擇那些常用的內參抗體(比如:β-actin、GAPDH抗體等)。當然了,針對哪些核蛋白很定的,我們可以考慮結合文獻來進行選擇;
4、根據表達恒定性挑選。挑選的抗體需要看其是否會受到條件變化的影響,比如溫度、PH值、濃度等方面的影響,這個很重要。比如,GAPDH常常用來作為內參抗體,到那時在進行代謝研究的時候,就不適用;
總的來說,內參抗體的選擇并沒有想象中的復雜,需要結合使用需求,選擇合適的。當實在不知道如何選擇的時候,我們可以結合相應的文獻來進行挑選,一般來說,都能夠選擇到合適的抗體產品。普健生物專業(yè)為廣大用戶提供優(yōu)質的抗體制備和定制服務,如果您有相關需求,歡迎來電咨詢。