雜交瘤抗體制備相信大家都不陌生，當(dāng)我們需要進(jìn)行單克隆抗體生產(chǎn)的時(shí)候都會(huì)使用都雜交瘤。但是我們知道，雜交瘤細(xì)胞在保存的過(guò)程中容易出現(xiàn)污染、基因丟失、細(xì)胞狀態(tài)比好等問(wèn)題，在后期的使用中會(huì)嚴(yán)重影響到抗體的質(zhì)量。所以，一般情況下，我們都會(huì)進(jìn)行雜交瘤測(cè)序，以保證后期外源抗體的穩(wěn)定表達(dá)。

　　什么是雜交瘤測(cè)序?

　　雜交瘤測(cè)序的概念其實(shí)并不困難，主要是通過(guò)提取雜交瘤細(xì)胞中抗體基因序列，并對(duì)進(jìn)行相應(yīng)的測(cè)序工作，得到所需段卡尼的核苷酸序列。當(dāng)后期需要使用的時(shí)候，可以按照序列制備出相應(yīng)的mRNA，然后再根據(jù)mRNA反轉(zhuǎn)錄出mDNA，之后再進(jìn)行基因序列的重組蛋白表達(dá)，最終獲得我們所需的抗體。

　　雜交瘤測(cè)序服務(wù)的內(nèi)容具體有哪些呢?

　　普健生物雜交瘤測(cè)序的過(guò)程主要分為五個(gè)階段，其中的一些階段會(huì)根據(jù)實(shí)際需求進(jìn)行增減。

　　階段一：cDNA擴(kuò)增。通過(guò)細(xì)胞裂解，擴(kuò)增第一聯(lián)cDNA;

　　階段二：抗體基因擴(kuò)增。對(duì)基因進(jìn)行預(yù)擴(kuò)增，并且分階段對(duì)基因進(jìn)行特異性擴(kuò)增;

　　階段三：基因測(cè)序。將基因可控到載體中，而后進(jìn)行相關(guān)核酸序列的測(cè)定，并對(duì)其生物學(xué)信息進(jìn)行分析;

　　階段四：抗體表達(dá)驗(yàn)證(可選)。通過(guò)測(cè)序所得基因及逆轉(zhuǎn)錄，制備質(zhì)粒，并對(duì)基因進(jìn)行瞬時(shí)轉(zhuǎn)染，并進(jìn)行相關(guān)抗體性質(zhì)檢測(cè);

　　階段五：抗體表達(dá)及純化(可選)。對(duì)所得抗體進(jìn)行純化操作;

　　總的來(lái)說(shuō)，雜交瘤測(cè)序的意義非常重大，不僅能夠減少雜交瘤傳代過(guò)程中純?cè)诘牟环€(wěn)定因素，而且能夠避免因?yàn)榕尾煌膯?wèn)題而造成的抗體性質(zhì)不同的現(xiàn)象。雜交瘤測(cè)序操作，能夠有效地避免這類情況的發(fā)生，通過(guò)重組蛋白表達(dá)的方式，獲得優(yōu)質(zhì)的抗體產(chǎn)品。普健生物專業(yè)為廣大用戶提供雜交瘤測(cè)序服務(wù)，如果您有相關(guān)需求，歡迎來(lái)電咨詢。