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噬菌體抗體文庫(kù)和噬菌體抗體庫(kù)的多樣性

發(fā)表時(shí)間:2023-08-30 訪問(wèn)次數(shù):495

癌癥等疾病的流行以及對(duì)免疫療法需求的增加正在推動(dòng)針對(duì)致病細(xì)胞和生物體的技術(shù)的發(fā)展。這導(dǎo)致了所謂的抗體庫(kù)的發(fā)展。從歷史上看,開(kāi)發(fā)預(yù)防疾病的疫苗和治療方法的主要方法是從感染后幸存下來(lái)的人身上收集抗體。免疫細(xì)胞需要分離,并且必須篩選大量抗體,以找到與特定病原體結(jié)合最緊密的抗體。然而,這可能很耗時(shí),有時(shí)時(shí)間至關(guān)重要——COVID-19大流行一直提醒著我們。

 

顧名思義,抗體庫(kù)是現(xiàn)有抗體的文庫(kù),可以搜索這些庫(kù)以提供可能對(duì)病原體有效的抗體。通過(guò)采用這種方法,可以大大加快藥物發(fā)現(xiàn)過(guò)程。通過(guò)從幾百人那里收集樣本,抗體庫(kù)中可以存儲(chǔ)許多倍的人類(lèi)抗體。

 

抗體庫(kù)是衍生抗體的重要資源,可用于廣泛的應(yīng)用,從結(jié)構(gòu)和功能研究到細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)干擾研究,再到開(kāi)發(fā)新的診斷和治療方法。無(wú)論目標(biāo)是什么,抗體庫(kù)的關(guān)鍵參數(shù)是其復(fù)雜性(也稱(chēng)為多樣性),即集合中不同元素的數(shù)量,這直接反映了在庫(kù)中發(fā)現(xiàn)針對(duì)給定抗原的抗體的概率,具有足夠高的親和力。由于抗體庫(kù)序列的高度相似性和長(zhǎng)度,長(zhǎng)期以來(lái),抗體庫(kù)復(fù)雜性和質(zhì)量的定量評(píng)估一直沒(méi)有得到充分解決。復(fù)雜性通常由轉(zhuǎn)化效率推斷,并通過(guò)指紋識(shí)別和/或?qū)装賯€(gè)隨機(jī)文庫(kù)元素的測(cè)序進(jìn)行測(cè)試。

 

抗體庫(kù)中常用的一種技術(shù)是噬菌體展示,其中表面帶有抗體的基因操縱噬菌體與固定化抗原結(jié)合。洗滌后,任何剩余的噬菌體都會(huì)顯示感興趣的抗體。然后可以將這些插入大腸桿菌中以擴(kuò)增抗體以進(jìn)行進(jìn)一步研究。

 

目前世界上有很多的全人源抗體庫(kù),可以分為天然抗體庫(kù),半合成抗體庫(kù)和合成抗體庫(kù),不過(guò)大部分抗體文庫(kù)都存在著供體少、庫(kù)容低、多樣性差、親和力弱、錯(cuò)配率高等問(wèn)題,普健生物構(gòu)建了千億級(jí)別、高親和力全人源重組天然抗體文庫(kù),經(jīng)過(guò)驗(yàn)證,任意靶點(diǎn)從文庫(kù)中直接篩選,一般可以獲得十幾個(gè)到上百個(gè)高親和力的克隆,其親和力、特異性都達(dá)到行業(yè)領(lǐng)先水平。

普健生物擁有領(lǐng)先的噬菌體技術(shù)平臺(tái),利用噬菌體展示技術(shù),普健生物提供構(gòu)建噬菌體展示抗體文庫(kù)、噬菌體展示多肽文庫(kù)、抗原表位篩選、抗體親和力成熟等技術(shù)服務(wù)。同時(shí)普健生物具有鼠源天然抗體文庫(kù)、兔源天然抗體文庫(kù)、納米抗體天然抗體文庫(kù)、重組全人源噬菌體抗體文庫(kù)等。

 

普健生物千億級(jí)全人重組抗體庫(kù)優(yōu)勢(shì):

1.序列正確性高,現(xiàn)階段庫(kù)容已達(dá)近千億級(jí)別(1011pfu)

2.兩步法建庫(kù),先連入輕鏈再連入重鏈,將來(lái)自全世界不同地區(qū)人種來(lái)源的輕鏈和重鏈隨機(jī)組合,保證了庫(kù)的高

質(zhì)量和多樣性。

3.分為κ和λ兩種輕鏈亞型的單鏈抗體庫(kù),與大多數(shù)商業(yè)化混合庫(kù)不同,即可用于篩選κ型抗體,也可用于篩

λ型的高親和力抗體。

4.帶有His標(biāo)簽,可直接用phagemid表達(dá)抗體,His標(biāo)簽純化。

QC檢測(cè):

1.總插入率及正確率

片段插入率100%,抗體序列正確率>90%

2.抗體序列多樣性分析

種系基因(Germline)分析:種系基因主要指單倍體生殖細(xì)胞和干細(xì)胞中所含有,未發(fā)生重排的全部基因??贵w

庫(kù)一般只分析抗體序列里面V基因的種系分布。

互補(bǔ)決定區(qū)(CDR)分析:抗體分子可分為恒定區(qū)和可變區(qū)兩部分。在可變區(qū)內(nèi)有一小部分氨基酸殘基變化特別強(qiáng)烈,

這個(gè)區(qū)域稱(chēng)高變區(qū)(HVR)。在L鏈、H鏈的V區(qū)中有三個(gè)高變區(qū),該部位因在空間結(jié)構(gòu)上可與抗原決定簇形成精密的互補(bǔ),

又稱(chēng)互補(bǔ)性決定區(qū)。

我們的優(yōu)勢(shì)

豐富的噬菌體抗體技術(shù)經(jīng)驗(yàn),五年以上噬菌體抗體開(kāi)發(fā),交付上百個(gè)噬菌體展示抗體開(kāi)發(fā)項(xiàng)目

具有全人源重組抗體庫(kù),庫(kù)容高達(dá)千億級(jí)別(1011pfu),兩步建庫(kù)法,保證了文庫(kù)的多樣性,抗體庫(kù)片段插入;正確率高;可以兩周拿到全人源重組抗體

可以構(gòu)建多物種(人源、小鼠、兔子、羊駝等)抗體文庫(kù)

可以構(gòu)建多種類(lèi)型(scfv、Fab、VHH等)的抗體文庫(kù)

 

研究人員越來(lái)越多地使用抗體庫(kù)來(lái)尋找新的藥物靶點(diǎn)、抗體、疾病的生物標(biāo)志物等。隨著更多抗體的發(fā)現(xiàn)和更多的組合被納入其中,新藥和疫苗的開(kāi)發(fā)將繼續(xù)顯示出改進(jìn)。

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