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納米抗體作為診斷工具的臨床應(yīng)用—— 用于病原體感染診斷

發(fā)表時間:2023-09-26 訪問次數(shù):458

納米抗體在病原菌引起的感染診斷方面的突出表現(xiàn),可以為疾病的早期診斷提供便捷,幫助我們快速控制疾病的惡化并達到治療的目的。

牛結(jié)核病是一種主要由于感染結(jié)核分枝桿菌發(fā)病且死亡率極高的慢性人畜共患傳染病,研究發(fā)現(xiàn)牛結(jié)核分枝桿菌表達多個分泌蛋白,其中Ag85B是牛結(jié)核分枝桿菌主要的分泌蛋白之一。目前已有研究已經(jīng)成功構(gòu)建了抗牛結(jié)核分枝桿菌VHH抗體庫,且以Ag85B蛋白為抗原,采用噬菌體展示技術(shù)經(jīng)淘選并富集及蛋白芯片互作技術(shù)篩選得到抗Ag85BVHH抗體,為牛結(jié)核病的診斷和治療奠定基礎(chǔ)。
沙門氏菌引發(fā)的食物中毒占據(jù)食物中毒首列,He等在對免疫駱駝納米抗體庫進行生物淘選后,首次分離出了針對腸炎沙門氏菌的納米抗體,將C端含有6×His標簽標記的3個納米抗體的質(zhì)粒亞克隆到大腸桿菌Top10F′中,通過異丙基-β-d-硫代半乳糖苷(isopropyl β-d-thiogalactoside, IPTG) 誘導(dǎo)過夜表達,并用Ni-NTA親和柱進行純化,最后開發(fā)了一種基于Nb 13的夾心ELISA法用于牛奶樣品中的腸炎沙門氏菌檢測,檢測限可達1.4×105 CFU/mL。
錐蟲病是一種由寄生蟲引起的睡眠病。Pinto等通過質(zhì)譜選擇后鑒定出一對特異性針對錐蟲丙酮酸激酶(TcoPYK) Nb(Nb44/Nb42),并建立了兩種異源夾心試驗法:側(cè)向流動側(cè)流法(LFAs) ELISA法用于檢測感染小鼠和牛血漿樣本中的寄生蟲病,測定LOD分別為220 ng/mL14 ng/mL,LFAs展示出了良好的特異性(92%)
此前,2010年在中國首次報道的蜱傳病毒發(fā)熱伴血小板減少綜合征布尼亞病毒(severe fever with thrombocytopenia syndrome virus, SFTSV) 可導(dǎo)致人患發(fā)熱伴血小板減少綜合征(severe fever with thrombocytopenia syndrome, SFTS)。吳喜林等通過篩選SFTS獲得特異性結(jié)合SFTSV表面糖蛋白(glycoprotein, GN) 的納米抗體VHH,鑒定CDR序列并構(gòu)建了人源化的VHH-HUFC1 (SNB抗體),通過試驗表明SNB抗體可應(yīng)用于SFTSV的檢測試劑盒的研發(fā),即納米抗體雙抗體夾心ELISA檢測sGN蛋白從而檢出SFTSV病毒,其中SNB01SNB37的雙抗組合檢測SFTSV真病毒的靈敏度為3.75×106 gc/mL。

納米抗體作為一種可塑性強、較為新穎的抗原識別和調(diào)控的工具,具備小尺寸、易表達和篩選及改造、高親性和穩(wěn)定性等優(yōu)勢,能夠識別傳統(tǒng)抗體難以識別的較為隱匿的抗原表位,在診斷治療各種疾病及檢測方面的應(yīng)用不斷深入,且在基礎(chǔ)研究中也發(fā)揮著不可替代的作用。


普健生物納米抗體主要通過免疫羊駝由羊駝體內(nèi)自身的抗體成熟階段來得到抗體基因,然后通過噬菌體展示篩選技術(shù)來從羊駝抗體庫中篩選得到最適合的抗體序列。普健生物一站式抗體發(fā)現(xiàn)整體解決方案可為您提供完善的納米抗體定制服務(wù),從抗原制備、羊駝免疫、噬菌體文庫構(gòu)建、噬菌體文庫淘選、表達純化到抗體生產(chǎn)、親和力排序,為您交付高標準的噬菌體免疫文庫、陽性菌株、VHH序列及技術(shù)服務(wù)報告等內(nèi)容。如果您近期有納米抗體定制相關(guān)需求,歡迎撥打服務(wù)咨詢熱線027-87001869,我們將竭誠為您服務(wù)!
我們的優(yōu)勢:
自建養(yǎng)殖基地:每年近百頭成年羊駝用于免疫,穩(wěn)定提供大量的免疫抗原
庫容大:近千億級別天然庫
淘選周期短:最快在2周內(nèi)可完成針對各類靶點的特異性納米抗體快速篩選
親和力高:抗體親和力可達10-9M 級別
樣本來源豐富:免疫庫源自百余只不同種類的駝類樣本-羊駝(Alpaca )、駱駝(Camel)、美洲駝(Llama),提供更高抗體多樣性
超高品質(zhì):插入正確率100%,序列正確率97%,隨機選取200個克隆測序,均無重復(fù)序列
可構(gòu)建免疫庫,獲得更高親和力VHH序列


參考文獻:
SUN S, TAN X, PANG XY, LI M, HAO XJ. Recent advances in the application of nanobody technology: a review. Chinese Journal of Biotechnology, 2022, 38(3): 855-867.
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