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蛋白純化之親和層析法的原理和優(yōu)缺點(diǎn)

發(fā)表時(shí)間:2023-09-12 訪問(wèn)次數(shù):2567

  蛋白純化是一種常用于提升蛋白純度的方法,它能夠提升蛋白的特性,讓實(shí)驗(yàn)更加成功。蛋白純化的方法有幾種,其中較為常用的就是親和層析法。在這里,普健生物和大家具體聊聊有關(guān)親和層析蛋白的原理及其優(yōu)缺點(diǎn)。

  親和層析純化的步驟:

  1、捕獲

  通過(guò)速度和容量之間進(jìn)行優(yōu)化組合,能夠讓產(chǎn)物能夠進(jìn)行有效地分離、濃縮和穩(wěn)定化處理。如果樣品帶標(biāo)簽,可以選擇親和層析,如果不帶標(biāo)簽,可以考慮離子交換;

  2、中度純化

  這個(gè)過(guò)程主要用于將目標(biāo)和大體積的雜質(zhì)分開(kāi)。在這個(gè)階段,速度不再是最重要的因素,一般考慮采用離子交換層析或疏水層析進(jìn)行進(jìn)一步樣品提純;

  3、精細(xì)純化

  在這個(gè)過(guò)程中,主要用于提升高分辨率。因?yàn)橐呀?jīng)去除了大部分的雜質(zhì),但是也可能造成一定的損失,這個(gè)時(shí)候,一般考慮使用高分辨率的分子篩或高分辨率的離子交換層析柱來(lái)進(jìn)行純化;

  親和層析的優(yōu)缺點(diǎn):

  1、這個(gè)方法非常有效,經(jīng)過(guò)一步步地手段,能夠提純蛋白質(zhì),然后將蛋白分離出來(lái),而且純度非常的高;

  2、這個(gè)方法能夠?qū)Ψ肿舆M(jìn)行選擇化分離,能夠提升純化倍數(shù)。經(jīng)過(guò)純化后的蛋白性質(zhì)更加穩(wěn)定,能夠有效提升其活性回收率。而且能夠有效減少純化步驟,縮短純化時(shí)間;

  3、但是,這個(gè)方法載體比較昂貴,機(jī)械強(qiáng)度低,而且所用配給需要首先進(jìn)行純化,各種成本相對(duì)較高;

  雖然說(shuō),蛋白純化的方法有好幾種,但是對(duì)于不同的使用環(huán)境來(lái)說(shuō),各個(gè)方法都有各自的優(yōu)勢(shì)。而且,隨著蛋白純化技術(shù)的不斷提升,相信未來(lái)能夠有更合適的方法來(lái)應(yīng)對(duì)各種不同的純化需求。普健生物專(zhuān)業(yè)為廣大用戶提供蛋白純化服務(wù),如果您有相關(guān)需求,歡迎來(lái)電咨詢。

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