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蛋白純化失敗?那你需要考慮考慮如下因素

發(fā)表時間:2022-12-14 訪問次數(shù):1865

  在之前的一次實驗中,不知道因為什么原因,導(dǎo)致實驗結(jié)果完全達不到預(yù)期。后來通過檢測才發(fā)現(xiàn)是因為蛋白純化不夠,雜質(zhì)太多以及蛋白濃度不夠,最終導(dǎo)致實驗失敗。為什么做過蛋白純化,純度還達不到實驗要求呢?今天普健生物就和大家具體聊聊。

  1、在蛋白純化之前,我們需要對其進行相應(yīng)的測試,當(dāng)然了,在進行測試之前,需要對蛋白的相關(guān)屬性進行了解。比如蛋白的性質(zhì)、敏感性、溶解度、PH敏感已經(jīng)環(huán)境需求等;

  2、蛋白的用途了解。一般來說,如果大量級的蛋白制備需求,則需要考慮到層析柱的尺寸問題,以及所得蛋白濃度問題,是否需要保持活性等等,只有這些方面都了解了,才能更好地制備蛋白;

  3、蛋白的檢測。不同的方法檢測出的蛋白性質(zhì)是有一定差別的。比如不同組分的蛋白溶液,需要結(jié)合其靈敏度、精密性、準確度等方面來綜合考慮純化的步驟,所以,選擇的檢測方法也需要有所針對性才行;

  4、緩沖物。為了提高蛋白的穩(wěn)定性、減少微生物生長、降低冰點或保持蛋白活性等需求,我們需要添加各種添加劑,比如蛋白酶抑制劑、防腐劑、還原劑等等。這個就需要結(jié)合蛋白的需求來考慮添加那種緩沖物;

  5、存儲條件。在保持活性的前提下,選擇合適的溫度、合適的PH值、是否冰凍、容器儲存等操作;

  總的來說,蛋白純化前,我們需要對蛋白的相關(guān)性質(zhì)進行了解,有針對性地選擇純化方式,過程中需要對其進行相關(guān)性質(zhì)檢測,以保證其能達到我們的需求;純化完成后,需要結(jié)合特性對其進行保存,以保證其活性的同時增長其保存時間。普健生物專業(yè)為廣大用戶提供蛋白純化服務(wù),如果您有相關(guān)需求,歡迎來電咨詢。

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